Vernici Srpske pravoslavne crkve i drugi pravoslavni hrišćani duhovske zadušnice posvećuju umrlim precima i posećuju grobove, pale sveće i služe pomene. Na dan kada se obeležavaju ove zadušnice, u crkvama se služi sveta liturgija i parastos, čita molitva za sve umrle u svim vremenima. Na grobljima se pale sveće, a sveštenici daju pojedinačne parastose, moleći Gospoda da bude milostiv prema pokojnicima. Po običajnom kalendaru, izlazak na groblja tokom zadušnica smatra se obavezom srodnika, a ako to nije moguće, sveća se može zapaliti i u crkvi. Duhovske zadušnice pominju se već od 12. veka u crkvenim knjigama. Umesto uobičajenog iznošenja hrane, Crkva poziva na molitvu i darivanje siromašnih, bolesnih i prognanih. Zadušnice se obeležavaju četiri puta godišnje i uvek su subotom. Duhovske zadušnice su poslednje zadušnice do oktobra kada će se 5. oktobra obeležiti Miholjske zadušnice, a Mitrovske, odnosno jesenje zadušnice, biće obeležene 2. novembra, u subotu uoči Mitrovdana, praznika posvećenog Svetom Dimitriju. U nedelju, 8. juna, pravoslavni vernici obeležavaju praznik Svete Trojice ili Duhove, koji se obeležava 50. dana posle Vaskrsa i desetog posle Spasovdana. Ovaj praznik se još naziva Pedesetnica i Silazak Svetog Duha na Apostole.